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[1]胡健,裴秀英,苏芹,等.结核分枝杆菌TB10.4亚单位疫苗的构建及免疫原性研究[J].宁夏医科大学学报,2015,(06):626-630.[doi:10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2015.06.005]
 HU Jian,PEI Xiuying,SU Qin,et al.-[J].Ningxia Medical University,2015,(06):626-630.[doi:10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2015.06.005]
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结核分枝杆菌TB10.4亚单位疫苗的构建及免疫原性研究(PDF)
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《宁夏医科大学学报》[ISSN:1005-8486/CN:64-1029/R]

卷:
期数:
2015年06期
页码:
626-630
栏目:
论著
出版日期:
2015-06-30

文章信息/Info

Title:
-
作者:
胡健; 裴秀英; 苏芹; 王博; 高玉婧; 蒲静; 张宁;
宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室/宁夏生殖与遗传重点实验室基础医学院医学科学技术研究中心; 宁夏医学科学研究所;
Author(s):
HU Jian;PEI Xiuying;SU Qin;WANG Bo;GAO Yujing;PU Jing;ZHANG Ning;Key Lab. of Fertility Preservation and Maintenance Ministry of Education /Key Lab. of Reproduction and Heredity of Ningxiathe Coll. of Basic MedicineNingxia Med. Univ.;Ningxia Institute of
关键词:
结核分枝杆菌 TB10.4 免疫原性
Keywords:
-
分类号:
R392
DOI:
10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2015.06.005
文献标志码:
-
摘要:
目的构建结核分枝杆菌TB10.4基因的原核表达载体,表达和纯化该蛋白,构建亚单位疫苗,并对其免疫原性进行研究。方法从重组质粒p ET-SUMO-TB 10.4获得基因片断后,将其插入到载体p ET-28a(+),转化Ecoli DH5α感受态细胞,随机筛选阳性克隆,测序正确后并将该重组质粒转化感受态大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析后,用Ni-NTA亲和层析柱进行纯化并复性。随机将C57BL/6雌性小鼠分为Tris-HCl组、TB10.4组(佐剂为DDA/Poly I∶C)及卡介苗(BCG)3组,每组10只,每只小鼠每次免疫200μL,其中DDA250μg及Poly I∶C 25μg,蛋白量为20μg,而BCG为5×106CFU,分别于1、4、7周皮下免疫小鼠。末次免疫4周后,用特异性抗原TB10.4刺激脾淋巴细胞,检测其分泌IFN-γ水平;用ELISA检测血清特异性抗体Ig G2b、Ig G1。结果构建了原核表达重组质粒p ET-28a-TB10.4,并在分子量约为10.4k Da处观察到蛋白条带;小鼠血清中产生特异性抗体Ig G2b与Ig G1,体外脾淋巴细胞受TB10.4刺激时分泌IFN-γ水平显著高于Tris-HCl组(P<0.05)及BCG组(P<0.05)。结论 TB10.4蛋白与佐剂构建了亚单位疫苗,该疫苗可在C57BL/7小鼠中诱导抗原特异性免疫应答,可作为新型结核亚单位疫苗的候选疫苗予以进一步研究。
Abstract:
-

参考文献/References:

-

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备注/Memo

备注/Memo:
【基金】 宁夏自然科学基金(NZ14224)
更新日期/Last Update: 1900-01-01